Prueba de Coombs

 COMPETENCIAS

5. Desarrolla innovaciones y propone soluciones a problemas a partir de métodos establecidos.

5.1 Sigue instrucciones y procedimientos de manera reflexiva, comprendiendo como cada uno de sus pasos contribuye al alcance de un objetivo.

5.6 Utiliza las tecnologías de la información y comunicación para procesar e interpretar información.

OBJETIVO

El alumno conocerá los eritrocitos sensibilizados por anticuerpos incompletos, que son capaces de ser aglutinados por la Antiglobulina Humana.

FUNDAMENTO

El suero de Coombs permite establecer la presencia de globulina y por lo tanto de anticuerpos, ya que son de la mismanaturaleza, los anticuerpos incompletos como son los que producen la eritroblastosis fetal y la anemia hemolítica adquirida, se absorben sobre la superficie del glóbulo rojo; pero no los aglutinan, el suero Antiglobulina permite reconocer estos glóbulos sensibilizados al combinarse con los anticuerpos globulínicos que ya cubren.

Es util reconocer estos globu1os sensibilizados al combinarse con los anticuerpos globulínicos que ya cubren su superficie el suero de coombs es ideal pués tiene anticuerpos contra las globulinas séricas humanas que abarcan cuatro grandes alfa1, alfa2, beta y gamma, y dentro de estos grupos se en cuentran anticuerpos Anti Rh incompletos, Anti-Duffi, Anti Kell el suero de Coombs se obtiene por inyecciones repetidas de sueros humanos del grupo “O” a conejos el animal sensibilizado de esta manera produce anticuerpos contra la fracción globulinica de las proteinas séricas y contra anticuerpos incompletos que pueden encontrarse revistiendo a los hematíes o bien es suspensión en el plasma, por lo que se llama Antiglobulina Humana, se preparan reactivos de amplio espectro mediante la mezcla de sueros obtenidos de distintos animales.

 La IgG no produce aglutinación de los eritrocitos, pero se fijan sobre ellos y permanecen sin soltarse, al agregar el suero de Coombs se forman puentes entre los fragmentos cercanos y es posible ver la aglutinación, revelando que esos eritrocitos estaban en realidad cubiertos de anticuerpos.

Prueba de Coombs Directa.

Fundamento: La prueba directa se realiza cuando el Antiuerpo se ha fijado sobre el eritrocito “in vivo”, permite establecer la sensibilizaci6n de los glóbulos rojos que tuvo lugar en el organismo. Se usa para el diagnóstico de eritroblastosis fetal, anemia hemolítica y reacciones hemolíticas postrasfusionales por sangre incompatible

MATERIAL Y EQUIPO

§  Ø 1 gradilla

§  Ø 4 tubos de 13 x 100

§  Ø 2 tubos de 10 x 75

§  Ø 2 pipetas Pasteur c/bulbo

§  Ø 1 centrifuga Serofuge

§  Ø 1 baño maría 37°C

§  Ø Solución salina en pizetas

§  Ø Suero de coombs

§  Ø Globulos rojos problema

§  Ø Globulos rojos “O” Rh negativos

TECNICA

1.   Para identificar los glóbulos rojos sensibilizados es necesario remover la totalidad del suero de los eritrocitos, mediante lavadas repetidas con suero salino. Este proceso es importante, pués si se dejan residuos proteicos se neutraliza el suero de Coombs y se obtendrán falsos negativos

2.   Se prepara una suspensión de glóbulos rojos al 5% de lacuál se colocan dos gotas en un tubo de ensaye y se procede al lavado por tres ocasiones

3.   Después del último lavado se resuspenden los glóbulos rojos nuevamente con una gota de solución salina, agregar dos gotasde suero de coombs y mezclar

4.  extraer el tubo cuidadosamente y observar si existe aglutinación en el fondo del tubo con leves movimientos de inclinación,

5.   Se aconseja como testigo utilizar hematíes de adulto no sensibilizados del mismo grupo del paciente. El testigo se prepara en un tubo poniendo una gota de sangre “O” Rh negativa y cuatro gotas de solución salina más una gota de suero anti Rh, incubar media hora, lavar por tres veces estos glóbulos y después se adiciona una gota de suero de Coombs

INTERPRETACION DE RESULTADOS

1.   La aglutinación en el tubo testigo no debe existir,

2.   Si el tubo problema presenta aglutinación, los glóbulosrojos están sensibilizados por algún anticuerpo incompleto

Prueba de Coombs Indirecta

Fundamento: En esta prueba la sensibilización se realiza in vitro, en la primera etapa se sensibilizan los glóbulos rojos testigos con el anticuerpo que se desea investigar (Rh negativo, factor Kell, Diego, etc.) y en la segunda etapa por medio de reactivo de Coombs se hace visible la sensibilización por medio del fenómeno de aglutinación macroscópica.

TÉCNICA

1.   En tubo poner cuatro gotas del suero promema y una gotade glóbulos rojos sensibilizados, suspendidos en solución salina al 5%, si se investigan anticuerpos Rh se usan glóbulos rojos tipo”O” Rh positivos

2.    se centrifuga el tubo a baja velocidad 3500 rpm x 1 minuto

3.   Se lavan los glóbulos rojos sensibilizados tres veces con solución salina, desechando el sobrenadante completamente en el último lavado, dejando solo el boton de eritrocitos en el fondo

4.   Agregar dos gotas de suero de Coombs, mezclar perfectamente

5.   Centrifugar a baja velocidad 2500 rpm y buscar aglutinación en el fondo del tubo

INTERPRETACION DE RESULTADOS

1.   Si se encontró aglutinación después del paso número 2, indica la presencia de aglutininas anti Rh en el suero problema

2.   Si la prueba es negativa, se puede presumir la existencia de anticuerpos incompletos o bloqueadores, y se comprueba prosiguiendo con la técnica.

3.   Se puede realizar diluciones del suero problema para conocer el titulo del aglutininas anti-Rh que existen en el paciente

RESULTADOS

El resultado obtenido fue; no presento aglutinación esto indica la compatibilidad de la muestra problema.

SIGNIFICADO DE LOS RESULTADOS ANORMALES

Una prueba de Coombs directa anormal (positiva) significa que usted tiene anticuerpos que actúan contra sus glóbulos rojos, lo cual puede deberse a:

• Anemia hemolítica  
• Leucemia linfocítica crónica u otro trastorno similar
• Eritroblastosis fetal (enfermedad hemolítica del recién nacido)
• Mononucleosis infecciosa
• Infección por micoplasma
• Sífilis
• Lupus eritematoso sistémico
• Reacción a transfusión como la ocasionada por unidades de sangre cotejadas de manera impropia

Esta prueba también puede ser anormal sin una causa clara, especialmente entre los ancianos.

Una prueba de Coombs indirecta anormal (positiva) significa que usted tiene anticuerpos que actuarán contra los glóbulos rojos que el cuerpo interpreta como extraños. Esto puede sugerir la presencia de:

• Anemia hemolítica autoinmunitaria o inducida por fármacos
• Eritroblastosis fetal (enfermedad hemolítica)
• Incompatibilidad sanguínea (cuando se utiliza en bancos de sangre)

                        ALUMNO: MANUEL BAUTISTA HERNÁNDEZ.

CBTis 199.

NUMERO DE LISTA 8.

GRADO Y GRUPO: 5DM.