viernes, 12 de septiembre de 2014

CUENTA DE PLAQUETAS CON CÁMARA DE NEUBAUER

CUENTA DE PLAQUETAS CON CÁMARA DE NEUBAUER
COMPETENCIAS:
5. Desarrolla innovaciones y propone soluciones a problemas a partir de métodos establecidos.
5.1 Sigue instrucciones y procedimientos de manera reflexiva, comprendiendo como cada uno de sus pasos contribuye al alcance de un objetivo.
5.6 Utiliza las tecnologías de la información y comunicación para procesar e interpretar información.
OBJETIVO
Realizar  e interpretar la técnica para la cuenta de trombocitos o plaquetas en la cámara de Neubauer.
FUNDAMENTO 
Los trombocitos o plaquetas constituyen una parte esencial del organismo hemostático del cuerpo. Son cuerpecillos hialinos incoloros que miden de 2-4 μ, de bordes irregulares, pero pueden tener forma esférica u ovalada, carecen de núcleo y son muy frágiles. Provienen de una célula gigante que mide de entre 50-100 μ de diámetro llamada megacariocito.

Una de las principales funciones de las plaquetas es participar en los mecanismos de la hemostasia (Hemos=sangre, stasis=detención) adhiriéndose entre ellas y a las paredes de los vasos sanguíneos lesionados, para formar así el trombo plaquetario o tapón hemostático.
El líquido diluyente puede ser una solución estéril de p-aminobenzoato de dietilaminoetilo (85 milimolar) y cloruro de sodio (31 milimolar). Este líquido se provee listo para usar y su conservación es indefinida en refrigerador (2 - 10° C) o puede ser también oxalato de amonio al 1%. El fundamento del método consiste en la producción de hemólisis por la utilización de un líquido hipotónico, y el mantenimiento de las plaquetas intactas y sin agrumar por la presencia de p-aminobenzoato de dietilaminoetilo.
 MATERIAL
v  Pipeta de Thoma para glóbulos rojos (perla roja)
v  Equipo para venopuncion (Tubo lila)
v  Boquilla roja
v  Tubo de goma
v  Tubos de ensayo
v  Papel parafilm
v  Cámara de Neubauer
v  Cubrehematimetro
v  Microscopio
v  Gasas
v  Caja de Petri
v  Papel filtro
SUSTANCIAS
Ø  Alcohol al 70%
Ø  Sangre venosa
Ø   Diluyente de plaquetas
PROCEDIMIENTO
1.    Obtener 10 ml de sangre venosa, en un tubo con anticoagulante EDTA
2.    Agitar la sangre de manera suave en el tubo para mezclarla con el anticoagulante
3.    Llevar la sangre hasta la marca 1.0 de la pipeta de Thoma. Limpiar la punta con una gasa
4.    Aforar con liquido diluyente de plaquetas hasta la marca 11 de la pipeta (Dilución 1:100)
5.    Tapar los extremos con papel parafilm y mezclar durante 1 minuto
6.    Colocar la Cámara de Neubauer sobre una superficie horizontal y poner el cubrehematímetro sobre las mesetas
7.    Descartar las primeras 4 gotas de la pipeta. Con la quinta gota cargar la cámara, depositándola entre la meseta y el cubrehematímetro y dejarla difundir por capilaridad, teniendo cuidado de que no se formen burbujas o se derrame el líquido hacia los surcos
8.    Colocar la cámara de Neubauer  ya cargada en el interior de una caja de Petri, con papel filtro humedecido en agua para evitar la evaporación, dejar en reposo de 10 a 15 minutos
9.    Observar al microscopio contando en la cuadricula central (para glóbulos  rojos) las plaquetas  que aparecen mucho más pequeñas que los hematíes, redondas, alargadas u ovales, altamente refringentes

10. El cuadro central de la cuadricula mide 1.0 mm por lado y está dividido en 16 cuadritos más pequeños, de tal manera que el número total de estos últimos es de 400, mismos en los que se lleva a cabo el recuento de plaquetas.

OBSERVACIONES


Cámara de Neubauer, 10x
 Se pueden distinguir solo algunos eritrocitos, mucho mayores que las plaquetas, que desprenden gran brillo




Cámara de Neubauer, 40x
Uno de los cuadros centrales, lleno de plaquetas, de forma redonda la mayoría u ovalada.
RESULTADOS
Los recuentos de plaquetas, al igual que los eritrocitos y leucocitos,  se expresan como concentraciones, que en este caso serían número de células por unidad de volumen de sangre, que es 1mm3
Después de contar las plaquetas presentes en los 400 cuadritos centrales, el número obtenido se multiplica por el factor de dilución  de la siguiente manera:
N° de plaquetas x mm3 = No. De plaquetas contadas X dilución X 10
Dilución: 1:100 
Este factor corresponde, para obtener los resultados por mm3 ya que el volumen de la cámara es de 0.1 mm3
El número de plaquetas fue de 535, por lo que al realizar los cálculos quedaron así:
No. de plaquetas = 535 X 100 X 10= 535 000 plaquetas por mm3, lo que indica un índice elevado de plaquetas.
PACIENTE
NO. DE PLAQUETAS
VLOR NORMAL
Millones de células/mm3
María Fernanda
375 000
150 000 - 450 000
Yameli Sotuyo
278 000
150 000 - 450 000
El Diagnostico de dichas pacientes corresponde a los valores normales de plaquetas en circulación. Por ésta causa, se determina sin riesgo alguno.



VALORES DE REFERENCIA
 (Millones de células/mm3)
 Hombres y Mujeres:………………………………..150 000 - 450 000



 CONCLUSIÓN

El recuento de plaquetas es de suma importancia y es parte del recuento celular de la sangre como prueba de rutina.

El paciente con un trastorno hemorrágico, clínicamente significativo, acude al médico con algunos tipos de síntomas hemorrágicos, con lo que se puede indicar la parte defectuosa del mecanismo de coagulación, y dentro de estas causas pueden estar la cantidad inadecuada de plaquetas.

La hemorragia de vasos sanguíneos subcutáneos  en piel intacta se puede ver como petequias o equimosis. Cuando se encuentran  equimosis en gran cantidad y sin traumatismo aparente, el trastorno se conoce como Diátesis Hemorrágica y puede ser producida por anormalidades en los vasos sanguíneos, por la disminución en el número de plaquetas o por el mal funcionamiento.

La disminución de plaquetas se denomina Trombopenia o púrpura trombocitopénica y se debe a lo siguiente:


·         Enfermedades autoinmunitarias (el organismo produce anticuerpos contra sus propias plaquetas)
·         Aplasia medular
·         
Radioterapia y quimioterapia por cáncer
·         
Leucemia aguda
·         
Coagulación intravascular diseminada 
·         
Anemia hemolítica microangiopática 
·         
Hiperesplenismo 
·         
Púrpura trombocitopénica idiopática 
·         
Prótesis de válvula coronaria 
·         
Transfusión de sangre 
·         
Choque anafiláctico 
·         
Algunas infecciones víricas
·         
Algunos fármacos


Y el aumento se denomina trombocitosis:

·         Anemia por déficit de hierro
·         Traumatismos 
·         
Tumores 
·         
Trombocitosis esencial 
·         
Policitemia vera
·         
Leucemia mieloide crónica

ALUMNO: MANUEL BAUTISTA HERNÁNDEZ.
GRADO Y GRUPO: 5 DM

ESCUELA: CBTis 199

DETERMINACIÓN DE AGLUTINÓGENOS (TIPADO GLOBULAR).

                     DETERMINACIÓN DE AGLUTINÓGENOS (TIPADO GLOBULAR).
             
             Grupo sanguíneo
                                                                      Y
                                                              Factor Rh.

COMPETENCIAS:
5. Desarrolla innovaciones y propone soluciones a problemas a partir de métodos establecidos.
5.1 Sigue instrucciones y procedimientos de manera reflexiva, comprendiendo como cada uno de sus pasos contribuye al alcance de un objetivo.
5.6 Utiliza las tecnologías de la información y comunicación para procesar e interpretar información.
OBJETIVO: 
Realizar correctamente la técnica para poder dar un correcto resultado, y así ser de buen servicio al paciente.
INTRODUCCION
en la membrana del glóbulo rojo existen complejos químicos llamados antígenos que representan los llamados o factores sanguíneos.
Se sabe que  estos complejos químicos se han generado de una sustancia llamada precursora, llamada sustancia H (HUMANA). Sobre esta sustancia se adhieren carbohidratos  en un  orden determinado. Para la sangre de tipo cero “o” se unen dos moléculas de galactosa, una de mucosa, una de glucosa y una de glucolisina.
Sobre esta cadena puede adherirse una nueva molécula y se cambia el tipo, si es de glcosamina se tiene el grupo “A” y si es de galactosa se tiene el grupo “B”. Si se unen ambas moléculas en diversa posición se tiene el grupo “AB”.
Los primeros grupos sanguíneos  que se descubrieron fueron los llamados ABO y actualmente se conocen muchos más.
El sistema Rh es independiente del sistema ABO, pero igual de importante en la tipificación sanguínea.
Hay antígenos presentes en los eritrocitos de casi todas las personas y se les llama universales, otros antígenos se han concentrado en una sola familia  y se les llama familiares, y se han encontrado algunos otros que pertenecen solamente a un individuo y se les llama personales.
La importancia de la determinación de los grupos sanguíneos y Rh  en el laboratorio es en las transfusiones sanguíneas y en la eritroblastosis fetal.

 FACTOR Rh.
Objetivo: el alumno determinara el grupo sanguíneo  y el factor Rh  de una muestra sanguínea, utilizando los antisueros correspondientes y previa demostración correctamente.
Introducción: los grupos  sanguíneos se han clasificado así por poseer características diferentes, estas características son los antígenos (aglutinógenos)  y los anticuerpos (aglutininas) que son los responsables de las reacciones adversas inmunológicas en las transfusiones.
MATERIAL
v 1 equipo de extracción sanguínea
v 1 placa de vidrio excavada
v 2 aplicadores d madera
v Lanceta estéril
v 4 tubos de ensaye  10 x 100
v Gradilla
v Centrífuga
REACTIVOS
·         Sueros anti-A, -B, D,
·         Solución isotónica de NaCl al 0.9%



METODO PARA PORTAOBJETOS O PLACA:
TECNICA: se utiliza  la punción cutánea por medio de la lanceta, se desecha la primera goa y se deposita 1 gota en cada una de las excavaciones de la placa en forma horizontal o marcar con letras A, B y Rh, posteriormente se añade una gota de suero anti A, anti B y anti D respectivamente.
Mezclar perfectamente con un hispo (aplicador) cada preparación (no contaminar las diferentes preparaciones).
Agitar suavemente la placa con movimientos circulares durante 30 segundos aproximadamente.
Leer el resultado (una aglutinación macroscópica indicará la reacción)


Anti A
Anti B
Anti D
El grupo sanguíneo y su factor será :
+
-
+
A Rh POSITIVO
+
-
-
A Rh NEGATIVO
-
+
+
B Rh POSITIVO  
-
+
-
B Rh NEGTIVO
+
+
+
AB Rh POSITIVO  
+
+
-
AB Rh NEGTIVO
-
-
+
O Rh POSITIVO
-
-
-
O Rh NEGATIVO

EN DONDE (+) existe aglutinación. (-) Ausencia de aglutinación.
MÉTODO DE TUBO DE ENSAYE.
            TECNICA: previa asepsia practicar venopunción y recoger un mililitro de sangre.
Depositar en un tubo de ensaye  .2 ml de sangre y 9.8 ml  de solución isotónica de NaCl  al .9% para formar una suspensión de eritrocitos al 2%.
Marcar tres tubos de ensaye con las letras A, B y  Rh respectivamente  depositar en el tubo “A” una gota de suero anti-A  en el tubo B  una gota de suero anti B  y en el tubo Rh una gota de suero anti D
Añadir a cada tubo una gota de suspensión de eritrocitos al 2%(preparadas con anterioridad).
Centrifugar a 1000 r.p.m. durante un minuto.
Sacar los tubos e inmediatamente  observar si existe aglutinación.


Interpretación de los resultados.
Si existe aglutinación en el tubo “A” la sangre es del tipo A
Si existe aglutinación en el tubo “B” la sangre es del tipo B
Si existe aglutinación en el tubo  “A Y B” la sangre es del tipo AB
Si no existe aglutinación en el tubo “A Y B” la sangre es del tipo O
Si existe aglutinación en el tubo “Rh” la sangre será de factor Rh positivo
Si no existe aglutinación en el tubo “Rh” la sangre será de factor Rh negativo

ANTI A
ANTI B
ANTI AB
ANTI D
A
AGLUTINÓ
NO AGLUTINÓ
AGLUTINÓ
NO AGLUTINÓ
B
NO AGLUTINÓ
AGLUTINÓ
AGLUTINÓ
NO AGLUTINÓ
AB
AGLUTINÓ
NO AGLUTINÓ
AGLUTINÓ
NO AGLUTINÓ
O
NO AGLUTINÓ
NO AGLUTINÓ
NO AGLUTINÓ
NO AGLUTINÓ
D
NO AGLUTINÓ
NO AGLUTINÓ
NO AGLUTINÓ
AGLUTINÓ


Resultados en el método de tubo de ensaye
Paciente
Grupo sanguíneo
 SANDRA BENITEZ
 AB POSITIVO AB(+)
 JENIFER TREJO
 O POSITIVO o(+)



PACIENTE: SANDRA                                                                PACIENTE: JENNIFER



CONCLUSIÓN:
Pudiera parecer de poca importancia el estudio de los grupos sanguíneos, sin embargo es algo fundamental ya que de ello depende el trato que se nos puede dar en alguna enfermedad o emergencia médica al necesitar una transfusión, o bien en el momento de contraer matrimonio y concebir a un hijo sano, puesto que el factor Rh puede causarle al bebé alguna enfermedad provocándole hasta la muerte.
 Existen también grupos sanguíneos muy raros para los cuales si es que pertenecemos a ellos debemos estar preparados y prevenidos en el caso de tener un accidente puesto que no es fácil conseguir donantes sanos con ese tipo de sangre.







Finalmente, cabe recalcar la importancia de este tema (principalmente para la mujer), puesto que si después del análisis respectivo, descube que presenta Rh-negativo, tendrá ciertas precauciones al elegir a su pareja, procurando que no sea un Rh-positivo, y así engendrar a un niño sano y en las condiciones adecuadas.