viernes, 6 de marzo de 2015

prueba inmunologica de embarazo

PRUEBA INMUNOLOGICA DE EMBARAZO

COMPETENCIAS
5. Desarrolla innovaciones y propone soluciones a problemas a partir de métodos establecidos.
5.1 Sigue instrucciones y procedimientos de manera reflexiva, comprendiendo como cada uno de sus pasos contribuye al alcance de un objetivo.
5.6 Utiliza las tecnologías de la información y comunicación para procesar e interpretar información.
FUNDAMENTO
 Inmunoensayo cromático con partículas de oro coloidal, esta prueba es cualitativa y detecta rápidamente la Hormona Gonadotropina Coriónica Humano (fracción b-HCG) presente en suero y orina.
En embarazos normales, la HCG puede detectarse en suero y orina, desde 7 días, después de la concepción, duplicando su concentración casa 1.3 a 2 días. Para el momento en que falta el primer periodo menstrual, la concentración de HCG es aproximadamente 100mUI/ml. Observándose niveles pico de 200,000 mUI/ml o más para el final del primer trimestre del embarazo. La pronta aparición de HCG después de la concepción y su subsecuente elevación en concentración al inicio de una gestación, la convierten en un excelente indicador para la detección temprana de embarazo. Además de las presuntivas evidencias de embarazo, las cuales se fundamentan ampliamente en síntomas subjetivos, tales como náusea con o sin vómito, disturbios en la micción, fatiga, cese de la menstruación y sensibilidad en los senos, la presencia de la Hormona Gonadotropina Coriónica (HCG) en el plasma materno y la excreción de ésta en la orina, proporciona las bases para las pruebas endocrinas de embarazo.

OBJETIVO
Al término de la práctica el alumno interpretará los resultados de una Prueba Inmunológica de Embarazo.
MATERIALES
1. Cartuchos de plástico compuestos de una membranas cubierta de anticuerpos anti-alfa HCG y partículas de oro coloidal marcadas con anticuerpos monoclonales de ratón contra la fracción beta de la Hormona Gonadotropina Coriónica humana. La presentación viene en sobre individuales sellados.
2. Pipetas plásticas desechables
o Centrífuga
o 4 tubos de ensaye de 13 x 100
o 1 pipeta graduada de 5ml
o 1 pipeta Pasteur, con bulbo
o 1 sobre de reactivo para PIE
o 1 Gradilla metálica
TECNICA
 

 1. De preferencia solicitar una muestra de la primera micción del día (no usar orinas con sangre).


 2. Agitar la muestra suavemente de manera circular, posteriormente pipetear 5 ml. De esta y colocarla en un tubo de ensaye para centrifugarla a 2500 r.p.m durante 5 minutos. 


 3. Teniendo cuidado de no tocar el sedimento, usar una cantidad del sobrenadante de la muestra centrifugada y depositar 2 gotas de esta, en el espacio de depósito de la placa reacción.

 4. Esperar de 1 a 5 minutos y observar en la pantalla de lectura de la placa si se presenta reacción de color en el control y test o solo del control.
 
 
RESULTADOS
los resultados fueron positivos ya qué se dio la presencia de la hormona gonodotrofinica corionica humana.
INTERPRETACION
la paciente presenta embarazo debido a los resultados (positivos). DOS Llineas claras
ALUMNO: MANUEL BAUTISTA HERNANDEZ
ESCUELA: CBTIS 199
GRUPO Y GRADO: 6 DM
 

viernes, 21 de noviembre de 2014

Prueba de Coombs
 COMPETENCIAS
5. Desarrolla innovaciones y propone soluciones a problemas a partir de métodos establecidos.
5.1 Sigue instrucciones y procedimientos de manera reflexiva, comprendiendo como cada uno de sus pasos contribuye al alcance de un objetivo.
5.6 Utiliza las tecnologías de la información y comunicación para procesar e interpretar información.

OBJETIVO
El alumno conocerá los eritrocitos sensibilizados por anticuerpos incompletos, que son capaces de ser aglutinados por la Antiglobulina Humana.

FUNDAMENTO
El suero de Coombs permite establecer la presencia de globulina y por lo tanto de anticuerpos, ya que son de la mismanaturaleza, los anticuerpos incompletos como son los que producen la eritroblastosis fetal y la anemia hemolítica adquirida, se absorben sobre la superficie del glóbulo rojo; pero no los aglutinan, el suero Antiglobulina permite reconocer estos glóbulos sensibilizados al combinarse con los anticuerpos globulínicos que ya cubren.

Es util reconocer estos globu1os sensibilizados al combinarse con los anticuerpos globulínicos que ya cubren su superficie el suero de coombs es ideal pués tiene anticuerpos contra las globulinas séricas humanas que abarcan cuatro grandes alfa1, alfa2, beta y gamma, y dentro de estos grupos se en cuentran anticuerpos Anti Rh incompletos, Anti-Duffi, Anti Kell el suero de Coombs se obtiene por inyecciones repetidas de sueros humanos del grupo “O” a conejos el animal sensibilizado de esta manera produce anticuerpos contra la fracción globulinica de las proteinas séricas y contra anticuerpos incompletos que pueden encontrarse revistiendo a los hematíes o bien es suspensión en el plasma, por lo que se llama Antiglobulina Humana, se preparan reactivos de amplio espectro mediante la mezcla de sueros obtenidos de distintos animales.

 La IgG no produce aglutinación de los eritrocitos, pero se fijan sobre ellos y permanecen sin soltarse, al agregar el suero de Coombs se forman puentes entre los fragmentos cercanos y es posible ver la aglutinación, revelando que esos eritrocitos estaban en realidad cubiertos de anticuerpos.

Prueba de Coombs Directa.

Fundamento: La prueba directa se realiza cuando el Antiuerpo se ha fijado sobre el eritrocito “in vivo”, permite establecer la sensibilizaci6n de los glóbulos rojos que tuvo lugar en el organismo. Se usa para el diagnóstico de eritroblastosis fetal, anemia hemolítica y reacciones hemolíticas postrasfusionales por sangre incompatible

MATERIAL Y EQUIPO

§  Ø 1 gradilla
§  Ø 4 tubos de 13 x 100
§  Ø 2 tubos de 10 x 75
§  Ø 2 pipetas Pasteur c/bulbo
§  Ø 1 centrifuga Serofuge
§  Ø 1 baño maría 37°C
§  Ø Solución salina en pizetas
§  Ø Suero de coombs
§  Ø Globulos rojos problema
§  Ø Globulos rojos “O” Rh negativos

TECNICA

1.   Para identificar los glóbulos rojos sensibilizados es necesario remover la totalidad del suero de los eritrocitos, mediante lavadas repetidas con suero salino. Este proceso es importante, pués si se dejan residuos proteicos se neutraliza el suero de Coombs y se obtendrán falsos negativos
2.   Se prepara una suspensión de glóbulos rojos al 5% de lacuál se colocan dos gotas en un tubo de ensaye y se procede al lavado por tres ocasiones
3.   Después del último lavado se resuspenden los glóbulos rojos nuevamente con una gota de solución salina, agregar dos gotasde suero de coombs y mezclar
4.  extraer el tubo cuidadosamente y observar si existe aglutinación en el fondo del tubo con leves movimientos de inclinación,
5.   Se aconseja como testigo utilizar hematíes de adulto no sensibilizados del mismo grupo del paciente. El testigo se prepara en un tubo poniendo una gota de sangre “O” Rh negativa y cuatro gotas de solución salina más una gota de suero anti Rh, incubar media hora, lavar por tres veces estos glóbulos y después se adiciona una gota de suero de Coombs

INTERPRETACION DE RESULTADOS

1.   La aglutinación en el tubo testigo no debe existir,
2.   Si el tubo problema presenta aglutinación, los glóbulosrojos están sensibilizados por algún anticuerpo incompleto


Prueba de Coombs Indirecta

Fundamento: En esta prueba la sensibilización se realiza in vitro, en la primera etapa se sensibilizan los glóbulos rojos testigos con el anticuerpo que se desea investigar (Rh negativo, factor Kell, Diego, etc.) y en la segunda etapa por medio de reactivo de Coombs se hace visible la sensibilización por medio del fenómeno de aglutinación macroscópica.

TÉCNICA
1.   En tubo poner cuatro gotas del suero promema y una gotade glóbulos rojos sensibilizados, suspendidos en solución salina al 5%, si se investigan anticuerpos Rh se usan glóbulos rojos tipo”O” Rh positivos





2.    se centrifuga el tubo a baja velocidad 3500 rpm x 1 minuto
3.   Se lavan los glóbulos rojos sensibilizados tres veces con solución salina, desechando el sobrenadante completamente en el último lavado, dejando solo el boton de eritrocitos en el fondo
4.   Agregar dos gotas de suero de Coombs, mezclar perfectamente
5.   Centrifugar a baja velocidad 2500 rpm y buscar aglutinación en el fondo del tubo

INTERPRETACION DE RESULTADOS

1.   Si se encontró aglutinación después del paso número 2, indica la presencia de aglutininas anti Rh en el suero problema
2.   Si la prueba es negativa, se puede presumir la existencia de anticuerpos incompletos o bloqueadores, y se comprueba prosiguiendo con la técnica.
3.   Se puede realizar diluciones del suero problema para conocer el titulo del aglutininas anti-Rh que existen en el paciente

RESULTADOS
El resultado obtenido fue; no presento aglutinación esto indica la compatibilidad de la muestra problema.
SIGNIFICADO DE LOS RESULTADOS ANORMALES
Una prueba de Coombs directa anormal (positiva) significa que usted tiene anticuerpos que actúan contra sus glóbulos rojos, lo cual puede deberse a:
  • Anemia hemolítica  
  • Leucemia linfocítica crónica u otro trastorno similar
  • Eritroblastosis fetal (enfermedad hemolítica del recién nacido)
  • Mononucleosis infecciosa
  • Infección por micoplasma
  • Sífilis
  • Lupus eritematoso sistémico
  • Reacción a transfusión como la ocasionada por unidades de sangre cotejadas de manera impropia
Esta prueba también puede ser anormal sin una causa clara, especialmente entre los ancianos.
Una prueba de Coombs indirecta anormal (positiva) significa que usted tiene anticuerpos que actuarán contra los glóbulos rojos que el cuerpo interpreta como extraños. Esto puede sugerir la presencia de:
  • Anemia hemolítica autoinmunitaria o inducida por fármacos
  • Eritroblastosis fetal (enfermedad hemolítica)
  • Incompatibilidad sanguínea (cuando se utiliza en bancos de sangre)

                        ALUMNO: MANUEL BAUTISTA HERNÁNDEZ.
CBTis 199.
NUMERO DE LISTA 8.
GRADO Y GRUPO: 5DM.


viernes, 7 de noviembre de 2014

Tipificación del sistema ABO

Tipificación del sistema ABO 
COMPETENCIAS
5. Desarrolla innovaciones y propone soluciones a problemas a partir de métodos establecidos.
5.1 Sigue instrucciones y procedimientos de manera reflexiva, comprendiendo como cada uno de sus pasos contribuye al alcance de un objetivo.
5.6 Utiliza las tecnologías de la información y comunicación para procesar e interpretar información.

OBJETIVO
Al término de la práctica el alumno determinara los cuatro grupos sanguíneos en sangre del sistema ABO.

GENERALIDADES
En la membrana del glóbulo rojo existen complejos químicos que representan los llamados grupos o factores sanguíneos Fué Landsteiner quién realizó en 1900 el importante descubrimiento de que los eritrocitos del hombre pertenecen a varios sistemas Antigénicos diferentes, este autor descubrió el sistema A B O.
 La clasificación del grupo sanguíneo está, determinada por la presencia o ausencia de los aglutinógenos en el eritrocito y las  aglutininas en el suero. Para la identificación del grupo sanguíneo ABO se deben hacer dos investigaciones consecutivas: la primera se llama tipado globular y es la determinación de los aglutinógenos eritrocíticos con antisueros o aglutininas conocidas, la segunda se llama tipado sérico o contratipado y es la identificación de las aglutininas utilizando glóbulos rojos con antisueros conocidos, los sueros patrones deben ser de alto titulo, estos sueros pueden ser preparados en el laboratorio o en su defecto, se consiguen en las casas comerciales de productos biológicos. La investigación de los aglutinógenos eritrociticos se deben realizarse por el método de  tubo de ensayo.
 Se utilizan tres reactivos llamados: suero anti A (de sangre b), de color azul y que contiene aglutininas alfa, suero anti B (de sangre a), de color amarillo y que contiene aglutininas beta,  existe además otro suero, el anti AB que contiene las dos aglutininas, alfa y beta.
FUNDAMENTO
Los antígenos de los hematíes son estructuras químicas que proporcionan propiedades específicas a su superficie y que solo pueden detectarse con anticuerpos que corresponden a esos antígenos la mayoría de estas reacciones antígeno-anticuerpo implican la aglutinación o hemólisis de los hematíes.




MATERIAL Y EQUIPO
§  Ø 1 gradilla
§  Ø 6 tubos 10 x 75
§  Ø 4 tubos 13 x 100
§  Ø 4 pipetas Pasteur con  bulbo
§  Ø Centrifuga clínica
§  Ø Sueros hemoclasificadores Anti-A, Anti B. Anti-AB
§  Ø Solución fisiológica en Pizeta
§  Ø Sangre problema

 

TÉCNICA
1.   Se prepara una suspensión de glóbulos rojos al 5%, previamente lavado en solución fisiológica.
2.   En una gradilla colocar 4 tubos de ensaye de 10 x 75, marcados con las letras A, B, AB y Control.


3.   En cada tubo poner una gota de suspensión de glóbulos rojos al 5%.
4.   En el tubo marcado con A poner una gota de suero anti A, en el tubo marcado con B, poner una gota de suero anti B, en el tubo AB una gota de suero anti AB

5.   Mezclar nuevamente y se procede a centrifugar a 2,500 r p m durante un minuto

6.   Se sacan los tubos cuidadosamente de la centrifuga evitando que se mezclen los glóbulos rojos que quedan depositados en el fondo de los tubos y para efectuar la lectura se sacuden cuidadosamente el botón del fondo, uno por uno buscando si existe aglutinación macroscópica.
7.   Si la aglutinación tuvo lugar, puede comprobarse en el seno del liquido claro los hematies que nadan y se flotan formando pequeños agrupamientos, si el resultado es negativo los glóbulos rojos se distribuyen uniformemente por el líquido.

10. El resultado se reporta de acuerdo a la intensidad del grupo y al color del  líquido sobre nadante, de una o varias cruces, hasta cuatro.
NOTA: Si existe duda en la lectura se podrá observar al microscopio una gota o        también se pueden incubar los tubos a 37° C. durante 30 minutos.



OBJETIVO
 Al contrario de las: pruebas anteriormente descritas que emplean sueros testigos, esta prueba utiliza glóbulos rojos testigos tipo A, B y AB en suspensión al 5% y suero de la persona a clasificar la prueba puede realizarse en tubo, de acuerdo con las técnicas antes descritas

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Grupo sanguíneo aglutinación en tubo

Anti A
Anti-B
Anti AB
Grupo A
Positivo
Negativo
Positivo
Grupo B
Negativo
Positivo
Positivo
  Grupo AB
Positivo
Positivo
Pos itivo
Grupo O
Negativo
Negativo
Negativo


                  






RESULTADOS
Paciente
                                                                                Grupo sanguíneo
 SANDRA BENITEZ
                                                                           AB POSITIVO AB(+)
 JENIFER TREJO
                                                                               O POSITIVO o(+)


 Es recomendable que la tipificación al  realizarse, los resultados son más confiables tubo, ya que la aglutinación se puede expresar en cruces, de una a cuatro, dependiendo del grado de la misma.
4 cruces; la aglutinación se presentará como un botón sólido con fondo claro y grumos gruesos.
3 cruces; la aglutinación serán varios grumos grandes con el fondo claro o rosado
2 cruces pocos grumos y muy pequeños,  una suspensión uniforme
1 cruz pocos grumos, muy pequeños, el fondo muy rosado.
Negativo: Una suspensión uniforme de color rojo.
OBSERVACIONES
Si sus glóbulos sanguíneos se pegan o aglutinan al mezclarse con:
  • Suero anti-A, usted tiene sangre tipo A.
  • Suero anti-B, usted tiene sangre tipo B.
  • Sueros anti-A y anti-B, entonces usted tiene sangre tipo AB.
Si los glóbulos sanguíneos no se pegan o aglutinan cuando se agrega suero anti-A y anti-B, usted tiene sangre tipo O.
Prueba inversa:
  • Si la sangre se aglutina únicamente cuando se agregan células B a la muestra, usted tiene sangre tipo A.
  • Si la sangre se aglutina únicamente cuando se agregan células A a la muestra, usted tiene sangre tipo B.
  • Si la sangre se aglutina cuando se agregan cualquiera de los tipos de células a la muestra, usted tiene sangre tipo O.
La falta de aglutinación de los glóbulos sanguíneos cuando la muestra se mezcla con ambos tipos de sangre indica que usted tiene sangre tipo AB.
Tipificación del Rh:
  • Si los glóbulos sanguíneos se pegan o aglutinan al mezclarlos con suero anti-Rh, usted tiene sangre de tipo Rh positivo.
  • Si la sangre no coagula al mezclarse con suero anti-Rh, usted tiene sangre de tipo Rh negativo.
ALUMNO: MANUEL BAUTISTA HERNÁNDEZ 
CBTis 199
NUMERO DE LISTA 8

GRADO Y GRUPO: 5DM