Prueba de
Coombs
COMPETENCIAS
5. Desarrolla innovaciones y
propone soluciones a problemas a partir de métodos establecidos.
5.1 Sigue instrucciones y
procedimientos de manera reflexiva, comprendiendo como cada uno de sus pasos
contribuye al alcance de un objetivo.
5.6 Utiliza las tecnologías de la
información y comunicación para procesar e interpretar información.
OBJETIVO
El alumno conocerá los eritrocitos
sensibilizados por anticuerpos incompletos, que son capaces de ser aglutinados
por la Antiglobulina Humana.
FUNDAMENTO
El suero de Coombs permite establecer
la presencia de globulina y por lo tanto de anticuerpos, ya que son de la
mismanaturaleza, los anticuerpos incompletos como son los que producen la
eritroblastosis fetal y la anemia hemolítica adquirida, se absorben sobre la
superficie del glóbulo rojo; pero no los aglutinan, el suero Antiglobulina
permite reconocer estos glóbulos sensibilizados al combinarse con los
anticuerpos globulínicos que ya cubren.
Es util reconocer
estos globu1os sensibilizados al combinarse con los anticuerpos globulínicos
que ya cubren su superficie el suero de coombs es ideal pués tiene anticuerpos
contra las globulinas séricas humanas que abarcan cuatro grandes alfa1, alfa2,
beta y gamma, y dentro de estos grupos se en cuentran anticuerpos Anti Rh
incompletos, Anti-Duffi, Anti Kell el suero de Coombs se obtiene por
inyecciones repetidas de sueros humanos del grupo “O” a conejos el animal
sensibilizado de esta manera produce anticuerpos contra la fracción globulinica
de las proteinas séricas y contra anticuerpos incompletos que pueden
encontrarse revistiendo a los hematíes o bien es suspensión en el plasma, por
lo que se llama Antiglobulina Humana, se preparan reactivos de amplio espectro
mediante la mezcla de sueros obtenidos de distintos animales.
La IgG no produce aglutinación de los
eritrocitos, pero se fijan sobre ellos y permanecen sin soltarse, al agregar el
suero de Coombs se forman puentes entre los fragmentos cercanos y es posible
ver la aglutinación, revelando que esos eritrocitos estaban en realidad
cubiertos de anticuerpos.
Prueba de
Coombs Directa.
Fundamento: La prueba directa se realiza cuando
el Antiuerpo se ha fijado sobre el eritrocito “in
vivo”, permite establecer la sensibilizaci6n de los glóbulos rojos que
tuvo lugar en el organismo. Se usa para el diagnóstico de eritroblastosis
fetal, anemia hemolítica y reacciones hemolíticas postrasfusionales por sangre
incompatible
MATERIAL Y EQUIPO
§ Ø 1 gradilla
§ Ø 4 tubos de 13 x 100
§ Ø 2 tubos de 10 x 75
§ Ø 2 pipetas Pasteur c/bulbo
§ Ø 1 centrifuga Serofuge
§ Ø 1 baño maría 37°C
§ Ø Solución salina en pizetas
§ Ø Suero de coombs
§ Ø Globulos rojos problema
§ Ø Globulos rojos “O” Rh negativos
TECNICA
1.
Para
identificar los glóbulos rojos sensibilizados es necesario remover la totalidad
del suero de los eritrocitos, mediante lavadas repetidas con suero salino. Este
proceso es importante, pués si se dejan residuos proteicos se neutraliza el
suero de Coombs y se obtendrán falsos negativos
2.
Se prepara
una suspensión de glóbulos rojos al 5% de lacuál se colocan dos gotas en un
tubo de ensaye y se procede al lavado por tres ocasiones
3.
Después
del último lavado se resuspenden los glóbulos rojos nuevamente con una gota de
solución salina, agregar dos gotasde suero de coombs y mezclar
4. extraer el tubo cuidadosamente y observar si existe
aglutinación en el fondo del tubo con leves movimientos de inclinación,
5.
Se
aconseja como testigo utilizar hematíes de adulto no sensibilizados del mismo
grupo del paciente. El testigo se prepara en un tubo poniendo una gota de
sangre “O” Rh negativa y cuatro
gotas de solución salina más una gota de suero anti Rh, incubar media hora,
lavar por tres veces estos glóbulos y después se adiciona una gota de suero de
Coombs
INTERPRETACION DE RESULTADOS
1.
La
aglutinación en el tubo testigo no debe existir,
2.
Si el tubo
problema presenta aglutinación, los glóbulosrojos están sensibilizados por
algún anticuerpo incompleto
Prueba de
Coombs Indirecta
Fundamento: En esta prueba la sensibilización se
realiza in vitro, en la primera etapa se sensibilizan los glóbulos rojos
testigos con el anticuerpo que se desea investigar (Rh negativo, factor Kell,
Diego, etc.) y en la segunda etapa por medio de reactivo de Coombs se hace
visible la sensibilización por medio del fenómeno de aglutinación macroscópica.
TÉCNICA
1.
En tubo
poner cuatro gotas del suero promema y una gotade glóbulos rojos
sensibilizados, suspendidos en solución salina al 5%, si se investigan
anticuerpos Rh se usan glóbulos rojos tipo”O” Rh positivos
2.
se centrifuga el tubo a baja velocidad 3500 rpm x 1 minuto
3.
Se lavan
los glóbulos rojos sensibilizados tres veces con solución salina, desechando el
sobrenadante completamente en el último lavado, dejando solo el boton de
eritrocitos en el fondo
4.
Agregar
dos gotas de suero de Coombs, mezclar perfectamente
5.
Centrifugar
a baja velocidad 2500 rpm y buscar aglutinación en el fondo del tubo
INTERPRETACION DE RESULTADOS
1.
Si se
encontró aglutinación después del paso número 2, indica la presencia de
aglutininas anti Rh en el suero problema
2.
Si la
prueba es negativa, se puede presumir la existencia de anticuerpos incompletos
o bloqueadores, y se comprueba prosiguiendo con la técnica.
3.
Se puede
realizar diluciones del suero problema para conocer el titulo del aglutininas
anti-Rh que existen en el paciente
RESULTADOS
El resultado obtenido fue; no presento aglutinación
esto indica la compatibilidad de la muestra problema.
SIGNIFICADO DE LOS RESULTADOS ANORMALES
Una prueba de Coombs directa anormal (positiva)
significa que usted tiene anticuerpos que actúan contra sus glóbulos rojos, lo
cual puede deberse a:
- Anemia
hemolítica
- Leucemia
linfocítica crónica u otro trastorno similar
- Eritroblastosis
fetal (enfermedad hemolítica del recién nacido)
- Mononucleosis
infecciosa
- Infección por micoplasma
- Sífilis
- Lupus
eritematoso sistémico
- Reacción
a transfusión como la ocasionada por unidades de sangre
cotejadas de manera impropia
Esta prueba también puede
ser anormal sin una causa clara, especialmente entre los ancianos.
Una prueba de Coombs indirecta anormal (positiva)
significa que usted tiene anticuerpos que actuarán contra los glóbulos rojos
que el cuerpo interpreta como extraños. Esto puede sugerir la presencia de:
- Anemia hemolítica autoinmunitaria o inducida
por fármacos
- Eritroblastosis fetal (enfermedad hemolítica)
- Incompatibilidad sanguínea (cuando se utiliza
en bancos de sangre)
ALUMNO: MANUEL BAUTISTA HERNÁNDEZ.
CBTis 199.
NUMERO DE LISTA 8.
GRADO Y GRUPO: 5DM.